2-[[2-Ethoxy-4-(4-hydroxy-1-piperidinyl) phenyl]amino]-5,11-dihydro-5,11-dimethyl-6H-pyrimido[4,5-b][1,4]benzodiazepine-6-

Productbeschrijving:

Naam van het product: 2-[[2-Ethoxy-4-(4-hydroxy-1-piperidinyl) fenyl]amino]-5,11-dihydro-5,11-dimethyl-6H-pyrimido[4,5-b][1,4]benzodiazepine-6-one CAS NO:1234480-50-2

Synoniemen:

XMD 8-92 (vrije basis);

6H-Pyrimido[4,5-b][1,4]benzodiazepine-6-een,2-[[2-ethoxy-4-(4-hydroxy-1-piperidinyl)phenyl]amino]-5,11-dihydro-5,11-dimethyl-;

Chemische en fysische eigenschappen:

Uiterlijk: wit tot bijna wit poeder

Test: ≥98,0%

Dichtheid:1.3 g/cm3

Kookpunt:7410,8°C bij 760 mmHg

Flitspunt:402.4°C

In Vitro

XMD8-92 vertoont de grootste affiniteit voor BMK1 met een gemeten dissociatieconstante (Kd) van 80 nM, terwijl DCAMKL2, TNK1 en PLK4 respectievelijk 190, 890 en 600 nM hebben.XMD8-92 wordt geprofileerd tegen alle detecteerbare kinasen in HeLa-cellysaten met behulp van de KiNativ-methode en blijkt ongeveer 10 keer selectiever voor BMK1 te zijn met een IC50 van 1..5 μM dan de meest krachtige off-targets, TNK1 (IC50=10 μM) en ACK1 (ook bekend als TNK2, IC50=18 μM).MEK5 wordt niet significant geremd door XMD8-92 tot 50 μM [1]. XMD8-92 toont een hoge selectiviteit voor BMK1 in een in vitro ATP-site competitieve bindingstest tegen 402 kinasen en in de KiNativ-methode tegen alle detecteerbare kinasen in HeLa-cellysaten.XMD8-92 blokkeert EGF-geïnduceerde activering van BMK1 met een IC50 van 240 nM en, heeft XMD8-92 bij concentraties tot 5 μM geen remmend effect op de activatie van ERK1/2 door EGF[2].

In vivo

De farmacokinetiek van XMD8-92 is geëvalueerd bij Sprague-Dawley ratten die een enkele intraveneuze of orale dosis kregen.0 uur halfwaardetijd van 26 ml/min/kgXMD8-92 heeft een matige weefselverdeling met een berekend verdelingsvolume van 3,4 L/kg.Na een eenmalige orale dosis van 2 mg/kgIn tolerabiliteitsonderzoeken werden maximale plasmaconcentraties van ongeveer 500 nM waargenomen na 30 minuten, met 34 nM overblijvend 8 uur na toediening.de hoge plasmaconcentraties van het geneesmiddel (ongeveer 10 μM na IP-dosering van 50 mg/kg) gedurende 14 dagen worden gehandhaafdXMD8-92 lijkt goed te worden verdragen en de muizen bleek gezond te zijn zonder tekenen van nood.De behandeling met XMD8-92 bij zowel immunocompetente als immunodeficiënte muizen blokkeerde de groei van long- en baarmoederhals xenograft tumoren., respectievelijk met 95%. This remarkable anti-tumor effect of XMD8-92 in lung and cervical xenograft tumor models is due to XMD8-92’s capacity to inhibit tumor cell proliferation through the PML suppression-inducted p21 checkpoint proteinBovendien leidt BMK1-knockout (KO) bij muizen tot volledige en onomkeerbare verwijdering van het BMK1-eiwit.Terwijl XMD8-92 behandeling bij muizen alleen de activiteit van BMK1 onderdruktTen tweede kan de vasculaire instabiliteit waargenomen bij BMK1 KO-muizen te wijten zijn aan het ontbreken van het C-terminale niet-kinase-domein van BMK1.die nog steeds aanwezig is tijdens de behandeling van dieren met XMD8-92 [2].

Kinase-onderzoek

KiNativ-profilering van XMD8-92 wordt uitgevoerd met zowel ATP als ADP acylphosfaat-desthiobiotine met de volgende modificaties.HeLa-cellysaten (5 mg/ml totaal eiwit) worden geïncubeerd in de aanwezigheid van XMD8-92 bij 50 μMAlle reacties worden in duplicaat uitgevoerd.Probe-reacties werden gedurende 10 minuten voortgezet en de reactie werd gestopt door toevoeging van ureum en verwerkt voor MS-analyse.. Samples are analyzed by LC-MS/MS on a linear ion trap mass spectrometer using a time segmented “target list” designed to collect MS/MS spectra from all kinase peptide-probe conjugates that can be detected in HeLa cell lysatesDeze doellijst wordt gegenereerd en gevalideerd door voorafgaande grondige analyse van HeLa-lysaten.Tot vier karakteristieke fragment-ionen voor elk kinasepeptide-probeconjugat worden gebruikt om signalen voor elke kinase te extraheren, en een vergelijking van met een remmer behandelde en met een controlemiddel behandelde (onbehandelde) lysaten maakt een precieze bepaling mogelijk van het percentage remming op elk punt.Een manuscript waarin de details van deze gerichte massa-spectrometrie benadering worden beschreven, is in voorbereiding [1].

Dierenbeheerder

Muizen[1] 5×105 HeLa-cellen worden in DMEM resuspended en subcutaan geïnjecteerd in de rechterflank van 6-weekse Nod/Scid-muizen (dag 0).De muizen werden gerandomiseerd in 2 groepen (6 dieren).De XMD8-92-groep (1-28 dagen) wordt behandeld met XMD8-92 in een dosis van 50 mg/kg tweemaal daags intraperitoneeel.De controlegroep krijgt dagelijks injecties van de drageroplossing als controlegroepOp dag 7 wordt de controlegroep gerandomiseerd in 2 groepen (6 dieren, XMD8-92, 7-28 dag, en 12 dieren, controle).de overige controlegroep wordt gerandomiseerd in 2 groepen (6 dieren)De behandeling met XMD8-92 in de groepen XMD8-92 (7-28 dagen) en XMD8-92 (14-28 dagen) wordt respectievelijk op dag 7 en dag 14 gestart.De grootte van de tumor wordt gemeten met behulp van een klem, en het volume van de tumor wordt bepaald[1].

Referenties:

[1] Yang Q, et al. Farmacologische remming van BMK1 onderdrukt tumorgroei door middel van promyelocyten leukemie eiwit.Cancer Cell. 2010 Sep 14;18(3):258-67.

Yang Q, et al. Het richten op de BMK1 MAP kinase weg in kankertherapie.

De kinase ALK stimuleert de kinase ERK5 om de expressie van het oncogene MYCN in neuroblastoma te bevorderen.

Als u geïnteresseerd bent in onze producten of vragen heeft, neem dan gerust contact met ons op!

De producten die onder octrooi vallen, worden uitsluitend aangeboden voor O & O-doeleinden, maar de uiteindelijke verantwoordelijkheid ligt bij de koper.